El presente estudio evalúa la estandarización del citómetro Novocyte Advanteon (Agilent, EE. UU.) para el análisis automatizado de linfocitos mediante una base de datos, utilizando como instrumentos de referencia el FACSCanto II y FACSLysing (BD Biosciences, EE. UU.), respectivamente.
Para ello, se planteó un protocolo dividido en tres etapas:
- Evaluación y selección del lisante: se analizaron 10 muestras de sangre periférica.
- Obtención de valores target: se utilizaron Rainbow Beads (Spherotec, EE. UU.) y 3 muestras de sangre periférica.
- Evaluación de la estandarización mediante la base de datos: se analizaron 20 muestras de sangre periférica.
Durante la evaluación de los lisantes, se seleccionó Excellyse I debido a que presentó la mejor superposición con el lisante y el instrumento de referencia, sin pérdida significativa de poblaciones celulares ni fluorescencia (p < 0,05).
Los valores target obtenidos a partir de las Rainbow Beads fueron evaluados en la última etapa del protocolo. Se obtuvo un reconocimiento automático de las poblaciones celulares superior al 95 % mediante la base de datos automatizada en muestras de sangre periférica de donantes sanos. Asimismo, los porcentajes de las poblaciones celulares obtenidos con el Novocyte Advanteon y el instrumento de referencia mostraron una buena correlación (> 0,96), con significancia estadística (p < 0,05).
Los resultados demuestran que es posible estandarizar el citómetro Novocyte Advanteon mediante el protocolo planteado para el análisis automatizado de linfocitos, utilizando la base de datos del software Infinicyt 2.0. Los resultados obtenidos son comparables con los establecidos bajo las recomendaciones del consorcio EuroFlow™.
Fuente: https://hdl.handle.net/20.500.12672/18723 Descargar – Archivo Adjunto
